氣相色譜分析、分離的科學(xué)方法，被廣泛應(yīng)用于人類生產(chǎn)生活的方方面面。GC2030Classic氣相色譜儀是泰特儀器氣相色譜儀中的實(shí)用型號(hào)，適用于對(duì)混合氣體中的各種成分進(jìn)行定性和定量分析。以下由泰特儀器技術(shù)人員主要介紹毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定牛奶中的甜蜜素。
甜蜜素（環(huán)己基氨基磺酸鈉）是人工合成的甜味劑，經(jīng)研究結(jié)果表明甜蜜素有致癌的可能性，所以美國(guó)聯(lián)邦法律禁止甜蜜素用作食品添加劑。
在GB2760—1996《食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》中對(duì)甜蜜素的添加量作了明確的規(guī)定，乳飲料及蛋白飲料中添加的最高限量為0.65 g∕kg。食品中甜蜜素的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)是GB∕T5009.97-2003，該標(biāo)準(zhǔn)中測(cè)定甜蜜素的方法有氣相色譜法（采用填充柱）、比色法和薄層層析法。
牛奶中的蛋白質(zhì)有醇蛋白、乳白蛋白和乳球蛋白，這3種蛋白質(zhì)生理價(jià)值高、消化吸收好，是優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)。牛奶因營(yíng)養(yǎng)全面，而成為人們生活中的必需品。因此實(shí)時(shí)、快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)牛奶制品中的添加成分和物質(zhì)含量是提高乳制品質(zhì)量的首要條件。在檢測(cè)食品和飲料中的甜蜜素時(shí)GC∕FID已被廣泛應(yīng)用，但由于在處理乳制品（高糖、高脂、高蛋白）的酯化過(guò)程中，易發(fā)生乳化現(xiàn)象，導(dǎo)致回收率偏低。因此本文試圖通過(guò)對(duì)沉降劑用量、酯化時(shí)間的優(yōu)化，減少酯化過(guò)程中的乳化現(xiàn)象，提高樣品的回收率，降低檢出限。
1 儀器與材料
1.1 檢測(cè)條件
進(jìn)樣體積：1 μL；毛細(xì)管柱；進(jìn)樣口溫度：160.0℃；檢測(cè)器：FID；柱溫75℃；分流比：10∶1；載氣：氮?dú)猓痪€速度：23.6 cm∕s；柱流量：0.8 mL∕min；H2流量：40 mL∕min；空氣流量：400 mL∕min。
1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
氣相色譜；SPH-300氫氣發(fā)生器、SPH-3空氣發(fā)生器（上海儀電分析儀器有限公司）；AL204電子天平（上海有限公司）；AS20500BDJ超聲波清洗器；M37610-33CN渦旋器（Thermo Scientific）；LD4-2A離心機(jī)（北京醫(yī)用離心機(jī)廠）。
1.3 化學(xué)試劑
甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)品（Supelco公司，色譜純）；沉降劑（同體積的100 g∕L乙酸鋅溶液+32 g∕L亞鐵氰化鉀），氯化鈉、正己烷、硫酸、亞硝酸鈉、無(wú)水硫酸鈉等試劑均為分析純。市售大理某品牌牛奶（出廠日期：2012年5月12日）。
2 試驗(yàn)方法
2.1 蛋白質(zhì)沉降
精密稱取充分震蕩混合均勻后的試樣20.0 g于100 mL具塞比色管中，加入10 mL蒸餾水，再加入5 mL沉降劑（卡瑞試劑），蒸餾水定容至刻度，充分混勻，靜置30 min待蛋白質(zhì)沉降完全后，過(guò)濾，收集續(xù)濾液備用。
2.2 酯化反應(yīng)
待上述續(xù)濾液靜置澄清后，精密移取20 mL于100 mL具塞比色管中，加入10 mL蒸餾水，加入50 g∕L亞硝酸鈉溶液和100 g∕L硫酸各5 mL，充分混勻，放入冰箱，靜置30 min，然后準(zhǔn)確加入10 mL正己烷和5 g氯化鈉，漩渦器上充分震蕩1 min，靜置，待有機(jī)相與水相分層后，離心分離，有機(jī)層經(jīng)無(wú)水硫酸鈉脫水，取適量于進(jìn)樣瓶中，進(jìn)樣分析，以峰面積外標(biāo)法定量。
2.3 對(duì)照品溶液制備
精密稱取甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)品50 mg于50 mL容量瓶中，加蒸餾水定容，搖勻，即得1.0 mg∕mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
牛奶中蛋白質(zhì)的存在會(huì)加劇酯化過(guò)程中的乳化現(xiàn)象，使有機(jī)相與水相不易分層，而卡瑞是一種廣泛使用的沉降劑，能很好的消除酯化過(guò)程中的乳化現(xiàn)象，且卡瑞試劑不出峰，故不影響分析測(cè)定。高溫會(huì)導(dǎo)致酯化反應(yīng)過(guò)程中生成的亞硝酸分解，不利于酯化反應(yīng)的進(jìn)行，故酯化反應(yīng)時(shí)必須放置在0℃冰箱中。本文通過(guò)研究用毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定牛奶中甜蜜素含量的分析方法，通過(guò)對(duì)沉降劑用量、酯化時(shí)間等條件的優(yōu)化，降低方法的檢出限。利用甜蜜素（環(huán)己基氨基磺酸鈉）在硫酸介質(zhì)中與亞硝酸鈉反應(yīng)后生成環(huán)己醇亞硝酸酯，用正己烷萃取，并用氣相色譜檢測(cè)環(huán)己醇亞硝酸酯的含量。甜蜜素的線性范圍為0.05～0.4 mg∕mL，方法檢出限為2 μg，加標(biāo)回收率在99.4%～102.5%之間，RSD為1.4%。該方法簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好，方法檢出限低，優(yōu)于GB∕T5009.97-2003法的4 μg檢出限。
